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单细胞测序技术飞速发展,尤其是单细胞转录组技术加速了生命科学各个领域的成果产出。但对单细胞基因组层面的研究仍然存在很多困难,其原因在于如何将单个细胞核内极其微量的 DNA 高保真、高均一和高产率地扩增至可测序水平。从而实现在单个细胞水平对多种基因变异类型进行高清分析的目的。

云准科技正在利用美国Bioskryb公司的单细胞全基因组及全长转录组技术,为客户提供单细胞多组学的检测服务,能够在单细胞水平同时获得全基因组和全长转录组的高质量多组学数据,从而满足辅助生殖、遗传病、肿瘤学、神经学、细胞学和感染性疾病等领域的前沿应用需求。

技术原理

BioSkryb单细胞全基因组测序完整解决方案

BioSkryb公司的单细胞全基因组检测技术是采用原代模版定向扩增技术(Primary Template-directed Amplification,PTA),对单个细胞的基因组进行拟线性扩增。即以基因组DNA为模版,加入随机6-9mer的引物进行扩增,扩增的过程中终结子会随机结合到扩增产物上以终止扩增。扩增形成的单链产物又会有新的引物结合,在Phi29聚合酶的作用下延伸成双链,此双链即为最终的PTA产物,此产物用于后续文库构建。此外,基于此原理也可以进行单细胞全长转录组的扩增。

服务内容

10x Genomics单细胞主要应用领域

10x Genomics单细胞技术优势

应用领域

技术优势

PTA技术是一种创新的拟线性单细胞基因组扩增技术,具有高保真性、高均一性,高重现性和高收率,能够有效地扩增微量的DNA,从而有效避免了因扩增错误引入的突变,以及因覆盖度不足导致突变漏检。

 

· 高灵敏度 单细胞基因组对突变的检测是bulk水平的约10倍

· 基因组覆盖度和分辨率高 线性模版定向扩增技术,基因组覆盖度达97%

· 转录组捕获率和覆盖度高 与基于液滴的RNA测序方法相比,增加了转录组的检出

· 可同时获得全基因组和转录组多组学数据 对单个细胞同时构建全基因组和全长mRNA转录组文库

 

单细胞全基因组检测服务

单细胞全基因组+全长 转录组检测服务

01、准备0.2ml无RNA酶的PCR管(单管,8连管,96孔无裙边PCR板均可),该PCR管必须可兼容PCR仪。

02、在需分选细胞的PCR管/板中,加入3ul Cell Buffer(Bioskryb)。

03、将待检测的细胞分选至已加入3ul Cell Buffer的孔中,推荐每 孔中细胞数为1-10个细胞,细胞需加入至Cell Buffer的管底部。

04、确定细胞加入后,盖好PCR管管盖或者对96PCR孔板进行封膜, 确保细胞不会侧漏,标记好名称,速冻,放入-80°C冰箱保存,或干冰运输至实验室。

*本服务仅限科研使用,不可用于临床诊断流程

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