活检样本结合Phenoptics多色免疫荧光方案揭示黑色素瘤免疫微环境

联合抑制BRAF/MEK是治疗黑色素瘤的公认疗法。2020年7月30日，FDA批准了Atezolizumab联合Cobimetinib和Vemurafenib，用于BRAF V600突变阳性、不能切除或转移性黑色素瘤患者治疗。而BRAF/MEK抑制剂对抗肿瘤免疫反应的影响也逐渐受到关注。

对此，来自德国的Jürgen C. Becker教授研究团队分析了黑色素瘤患者在使用BRAF/MEK抑制剂治疗前和治疗期间的肿瘤活检样本，对患者在治疗过程中的免疫反应变化和机制进行了研究。

Becker教授的团队使用多重免疫荧光染色对肿瘤组织微环境进了分析，发现治疗后CD4+和CD8+ T细胞浸润增加。进一步分析T细胞受体来源，发现治疗诱导了T细胞克隆型丰富度和多样性的增加。这种扩增可能是通过诱导T细胞中的T-bet和TCF7来促进的。而这两种转录因子是CD8+记忆T细胞自我更新和持续存在所必需的。这些结果表明，对黑色素瘤患者的BRAF/MEK抑制可以通过诱导T-bet和TCF7，扩增已经存在的黑色素瘤特异性T细胞。

作者使用多色免疫荧光技术，对CD4(绿色)、CD8(黄色)、CD20(红色)、Foxp3(橙色)、CD68(紫色)、黑色素瘤标志物(MART-1，淡蓝色)、DAPI(蓝色)进行染色，观察BRAF/MEK靶向治疗引起的转移性病变中免疫浸润成分的变化。所有患者中CD4+ T细胞浸润增加，有2例患者中CD8+ T细胞浸润增加。