Phenoptics多色免疫荧光示踪CAR-T实体瘤治疗中的免疫微环境

CAR-T疗法在血液病治疗上效果惊人，其在实体瘤方面的治疗效果也备受关注。然而，目前CAR-T治疗方案在上皮恶性肿瘤方面的效果有限，主要受阻于靶向肿瘤相关抗原受ROR1的CAR-T细胞难以浸润肿瘤。

近日，《Cancer Cell》上发表了题为《Immunogenic Chemotherapy Enhances Recruitment of CAR-T Cells to Lung Tumors and Improves Antitumor Efficacy when Combined with Checkpoint Blockade》的研究。研究团队试图建立一个忠实地模拟肿瘤发展和肿瘤微环境(TME)发生的恶性上皮肿瘤模型，以指导临床策略，提高CAR-T细胞在实体肿瘤中的疗效。

Srivastava等人证明，在CAR-T细胞输注之前，将奥沙利铂加入到淋巴衰竭的方案，可激活肺肿瘤巨噬细胞产生T细胞招募趋化因子。从而改善了CAR-T细胞的浸润、肿瘤重塑和对免疫检查点抑制的反应，为提高CAR-T细胞在临床中的疗效提供了一种新的策略。

在研究过程中，作者使用了一个模拟非小细胞肺癌起始、进展和治疗反应的GEM模型，证明了CAR-T细胞向肿瘤的迁移可以通过Ox/Cy化疗前治疗得到改善，并且当结合抗PD-L1免疫抑制时，该方案可以提高生存率。从机制上讲，Ox/Cy激活多种促炎通路，包括在TME中多种细胞类型的T细胞招募趋化因子的表达，这有助于部分依赖于CCR5和CXCR6表达的CAR-T细胞向肿瘤的初始招募。CAR-T细胞浸润产生IFN-γ 并重塑肿瘤微环境（TME），以激活表达CXCR3配体CXCL9和CXCL10的M1巨噬细胞，启动一个正反馈回路，进一步支持CXCR3依赖的CAR-T细胞向肿瘤募集。

图注：难治性三阴性乳腺癌(TNBC)患者x566的治疗时间表

作者还收集了一位接受了Ox/Cy治疗的难治性TNBC患者治疗前后的肿瘤活组织切片，对此方案的临床疗效进行了评估， 并结合多色免疫荧光技术（CD3, COX2, CD206, VISTA, B7H3, CD163），对活检样中的肿瘤微环境进行了观察。在Ox / Cy和CAR-T治疗后的第18天，样本中CD3 + T细胞增加，CD206 + / CD163 +“M2”式的巨噬细胞的减少，与之前的动物模型试验结果一致。在部分缓解期第203天，对残留肿瘤再次活检，发现肿瘤内CD3+ T细胞进一步增加，CD206+巨噬细胞减少，这再次与我们的结果一致，表明随着时间的推移，肿瘤微环境发生了进展性重塑。

图注：在ROR1+三阴性乳腺癌患者中，Ox/Cy和CAR-T细胞减少了CD206+肿瘤巨噬细胞，并改善了肿瘤内T细胞的浸润