Akoya多色免疫荧光助力肿瘤免疫微环境研究之系列专题五——黑色素瘤

Blockade of the co-inhibitory molecule PD-1 unleashes ILC2-dependent antitumor immunity in melanoma

Nicolas Jacquelot et al. Nature Immunology 

DOI: 10.1038/s41590-021-00943-z

先天淋巴细胞 (ILC2) 对维持组织稳态至关重要。在癌症中，ILC2s 可以同时具有促肿瘤发生和抗肿瘤发生的功能，但我们对其潜在机制知之甚少，也不知道它们是否具有临床相关性或针对性以改善患者的预后。在这篇文章中，作者发现人类黑色素瘤中的高 ILC2 浸润和良好的临床预后相关。ILC2s 是细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的关键生产者，它协调嗜酸性粒细胞的募集和激活以增强抗肿瘤反应。但是肿瘤浸润的 ILC2s 部分表达PD-1，这限制了它们的肿瘤内积累、增殖和抗肿瘤效应功能。利用白介素 33 诱导ILC2 激活，同时对PD-1 加以阻断能够显著增加抗肿瘤反应，从而在体内克服这种免疫抑制作用。总之，文章的结果将 ILC2 鉴定为参与黑色素瘤免疫的关键免疫细胞类型，并揭示了利用 ILC2 功能进行抗肿瘤免疫治疗的潜在协同方法。

在这篇文章中，作者利用Akoya多色免疫荧光技术对黑色素瘤样本进行多靶标共定位分析，鉴定了ILC2在肿瘤区域的浸润，同时根据其空间位置关系，判断其与PD-L1+细胞具有紧密的相互作用。

Heterogeneity in tertiary lymphoid structure B-cells correlates with patient survival in metastatic melanoma

Kevin T Lynch et al. Journal for ImmunoTherapy of Cancer 

DOI: 10.1136/jitc-2020-002273

三级淋巴结构（TLS）是外周组织中的免疫聚集体，能够促进适应性免疫反应。它们的存在与检查点阻断疗法 (CBT) 的临床反应有关，但尚不清楚 TLS 是否具有独立于黑色素瘤CBT 的预后意义。为了验证黑色素瘤转移中的 TLS 与肿瘤内淋巴细胞浸润增加以及生存率的提高有关。作者分析了 TLS 内淋巴细胞的密度、增殖和B 细胞 Ig 体细胞超变 (AID+)、 T 细胞耗竭以及Th1/Tc1 分化的标志物。评估了 TLS 成熟程度与 TLS 内免疫活性之间的关联，以及与肿瘤内免疫细胞浸润的关联。结果表明转移性皮肤黑色素瘤中 TLS 的存在与 CBT 前接受手术治疗的患者的总生存期（OS）的改善相关，但 TLS 在成熟状态、增殖 T 和 B 细胞的比例以及 B 细胞功能标志物（包括 AID 和 CD21）方面差异很大，这意味着这些特征具有额外的预后意义，表明某些 TLS 可能具有调节抗肿瘤免疫的功能。

在这篇文章中，作者利用Akoya多色免疫荧光技术评估了黑色素瘤样本中 TLS 存在与否及其成熟状态，同时，根据它们的特异性靶标表达，分析了不同的黑色素瘤样本TLS中免疫细胞的异质性。

Linking Transcriptomic and Imaging Data Defines Features of a Favorable Tumor Immune Microenvironment and Identifies a Combination Biomarker for Primary Melanoma

Robyn D Gartrell-Corrado et al. Cancer Research 

DOI: 10.1158/0008-5472.can-19-2039

进行手术切除后的II-III期黑色素瘤患者的死亡率仍然高达35%。因此需要我们对肿瘤免疫微环境 (TIME) 进行更深入的了解，以对患者进行精确分型并确定导致治疗抗性的因素。之前的研究发现黑色素瘤免疫谱 (MIP)、基于 IFN 的基因特征以及 CD8+ 细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 与 CD68+ 巨噬细胞的比率都可以预测疾病特异性存活 (DSS)。在这篇文章中，作者比较了原发性肿瘤和转移性肿瘤，发现转移灶中肿瘤细胞的细胞核明显更大；CTL/巨噬细胞比率在非远处转移复发 (DMR) 和转移的原发肿瘤之间存在显著差异；非DMR 的患者在肿瘤细胞和 CTL 以及 HLA-DR+ 巨噬细胞之间有更高程度的聚集；HLA-DR-亚群共表达 CD163+CSF1R+ 的水平高于 CD68+HLA-DR+ 巨噬细胞，与 M2 表型一致。最后，转录组学和多重数据分析结果显示 CD8 和 M1 巨噬细胞的密度与其各自的细胞表型特征相关。MIP 特征与 CTL/巨噬细胞比率的组合将患者分为三个可预测疾病特异性存活（DSS）的风险组，验证了组合生物标志物在辅助治疗中的潜在用途。这些发现通过结合多种方式将患者分为不同的风险组，提供了对肿瘤免疫微环境的更深入了解，这是改善黑色素瘤患者管理的关键一步。

在这篇文章中，作者利用多色免疫荧光技术对黑色素瘤样本进行多靶标共定位分析，对肿瘤微环境中的巨噬细胞亚型进行了精准分型，同时验证了不同的巨噬细胞各自所表达的特异性靶标。

Human pDCs Are Superior to cDC2s in Attracting Cytolytic Lymphocytes in Melanoma Patients Receiving DC Vaccination

Jasper J P van Beek et al. Cell Reports DOI: 10.1016/j.celrep.2019.12.096

浆细胞样树突状细胞（pDC）和2型常规树突状细胞（cDC2s）是否可用于癌症疫苗仍有待评估。尽管两个DC亚群都可以激活适应性和先天淋巴细胞，但很少有研究表明它们募集此类细胞的能力。在这篇文章中，作者的研究显示pDC和cDC2在趋化因子分泌方面显示出惊人的差异，而这些细胞因子与不同类型的免疫细胞的募集息息相关。与cDC2s相比，活化的pDC在体外表达高水平的CXCR3配体并且能够吸引更多的CD8 + T细胞，CD56 + T细胞和γδT细胞。文章的结果表明黑色素瘤患者的皮肤在用pDC或cDC2进行皮内接种后显示出免疫细胞的浸润，其中pDC能够诱导具有溶细胞活性的淋巴细胞浸润。

在这篇文章中，作者利用Akoya多色免疫荧光技术对pDCs激活前后的黑色素瘤患者皮肤样本进行多靶标标记分析，结果表明在皮内注射 pDCs 后，黑色素瘤患者的皮肤表现出强烈的效应淋巴细胞浸润。