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Visium系列空间基因表达解决方案

基因表达·空间位置可视化

细胞在组织样本中相对的位置关系对于理解疾病病理学至关重要。Visium系列空间基因表达解决方案(包括Visium、Visium CytAssist、Visium HD)不仅可以检测带有空间分辨的全转录组表达,同时还可以捕获相同组织切片中的组织学信息,并且可以将基因表达谱映射回组织原始的位置。

 

该解决方案为癌症,免疫生理学,神经科学,发育生物学等领域的研究提供组织和基因表达复杂性的新视角。

Visium系列空间基因表达解决方案工作流程

Visium用于文库构建的每张载玻片上有四个6.5x6.5mm大小的捕获区域(Visium CytAssist载玻片有6.5mm和11mm两种规格),每个6.5mm大小捕获区域含有5000个被条形码标记的点(barcoded spots),直径为55 μm,(两点之间中心的距离为100 μm),每个点都有一个独特的条形码序列,当RNA从组织切片的细胞中释放出来后,迁移到每个点的RNA会被标记上相应的条形码序列,然后进行文库构建并进行测序。接下来,根据数据的条形码信息对数据进行分配,以确定哪些数据来自哪个位置。最终实现空间基因表达的可视化。

Visium系列空间基因表达解决方案送样要求

Visium系列空间基因表达解决方案技术优势

图 小鼠大脑空间分率的表达及聚类


A.对小鼠大脑切片进行H&E染色,成像,然后通过10x Genomics公司 visium空间基因表达解决方案工作流程进行处理;

B.展示了含有UMI计数的数据与组织空间位置的图像叠加;

C.总基因计数;

D.基于总差异表达基因的空间 naive聚类( spatially naive clustering)。最右边显示了相比于其他细胞義,在细胞族4(绿色)中高表达的基因

  将空间分辨的全转录组分析与形态学背景相结合,补充单细胞基因表达在空间信息上的空白

 

  通过绘制基因活动发生的位置,获得疾病复杂性的完整视图

 

  通过无偏分析发现新的目标

 

 

图 小鼠大脑中空间分辨率的基因表达


AH&E染色小鼠冠状脑组织切片;基因 Selena(B)和基因Tmsb4x(C)的空间mRNA表达为大脑中已知的表达模式,主要在海马体中
表达。图中结果显示了这两个基因在海马体中有显著表达,井且与已知的表达模式一致(注意・点大小不是按比例缩放)。

Visium系列空间基因表达解决方案研究领域

Visium系列空间基因表达解决方案主要原理

Visium系列空间基因表达解决方案结果展示

*本服务仅限科研使用,不可用于临床诊断流程

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Visium / Visium Cytassist

Visium 空间转录组

Visium HD

Visium HD能够在单细胞分辨率上进行全转录组空间分析,通过CytAssist从载玻片的组织上,将转录组探针对转移到Visium HD芯片的对应捕获区域,之后进行探针延伸并建库。Visium HD芯片有2个6.5 x 6.5mm捕获区域,由约1100万个2µm x 2µm的空间条形码方阵组成,方阵里有连续排列的寡核苷酸序列,方阵之间没有间隙,实现全组织覆盖。获得数据根据不同细胞大小选择合适的最小分析单位(推荐合并为8µm x 8µm),用于可视化和后续分析。

Visium CytAssist 空间转录组+蛋白组

Visium HD 单细胞分辨率空间转录组

Visium

Visium CytAssist

  更少切片:无需进行组织粘附测试,少量切片即可开展正式实验

 

  质控要求低:样本RIN值大于4,可以检测更多保存较久的高度降解的样本

 

  高检出率:探针Panel中约90%的基因设计了三对探针对,提高了基因的检出效率及特异性

 

➤  更灵活:对样本进行初筛后,选定感兴趣的区域再进行后续实验,实现切片区域的灵活选定,避免样本选片不合适造成浪费

 

  更简便:不需要再进行组织优化,操作流程简化,降低人工误差

 

  面积大:可提供6.5 mmx6.5 mm标准面积和11 mmx11mm大面积捕获区域,解锁更多可能性

     

Visium HD

  单细胞分辨率的全转录组分析

 

  连续的组织覆盖,无间隔

 

  由基于探针的Visium CytAssist提供一流数据

 

图 Visium HD单细胞分辨率空间转录组数据展示

 

Visium HD以其极高的分辨率可用于探索微小组织结构中独特的生物学特征;还可定位组织驻留细胞群,包括免疫细胞或癌细胞,以发现它们的相互作用和对疾病或治疗反应的影响。